本文標題："植物質(zhì)體分析-葉綠體觀(guān)察生物顯微鏡"

植物質(zhì)體分析-葉綠體觀(guān)察生物顯微鏡

    幾乎所有植物組織中都有質(zhì)體存在。所有質(zhì)體都由至少兩層膜包圍。
葉綠體是研究的最透徹的質(zhì)體，以具有稱(chēng)為類(lèi)囊體的能進(jìn)行光合作用的內膜為特征.、
非綠色質(zhì)體幾乎不含內膜，通常存在于根部、花和果實(shí)中

    分離到的葉綠體通常用于研究蛋白定位、蛋白合成和光合作用:
這種方法主要用于分離豌豆和菠菜中的質(zhì)體.經(jīng)過(guò)改進(jìn)后可用于
其他物種的質(zhì)體分離

分離完整葉綠體有二個(gè)主要困難:

    (1)植物細胞被堅韌的纖維質(zhì)細胞壁包圍。破碎細胞的力量要能足以打破細胞壁同
時(shí)還要保持葉綠體的完整。如果質(zhì)體較小，通過(guò)使用帶有剃刀片的Polvtrvn
( Brirkmann)或Wraring攪切器進(jìn)行簡(jiǎn)短的勻漿，很大一部分質(zhì)體會(huì )從破碎細胞中完整
地釋放出來(lái)。通過(guò)Percoll梯度離心，即可將完整質(zhì)體與破碎的質(zhì)體分離開(kāi)來(lái)。

    (2)質(zhì)體中由淀粉積累成的致密顆粒會(huì )在離心過(guò)程中使質(zhì)體破裂。
淀粉的積累可以通過(guò)讓植株在短光照時(shí)間和/或低光照強度的條件下
生長(cháng)而得以消除。若有必要，可以在勻漿前將植株置放在黑暗中
24一48小時(shí)以去除淀粉。

    (3)勻漿過(guò)程中.液飽中貯存的有毒物質(zhì)會(huì )釋放出來(lái)。在有酚類(lèi)化合物積聚的物種
中，可以通過(guò)在研磨緩沖液中加人可溶解的聚乙烯毗咯烷酮、BSA和琉基化合物來(lái)降低
其有害影響。
 

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