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本文標題:"電子顯微鏡研究細胞的精細結構的實(shí)驗方法簡(jiǎn)介"

發(fā)布者:yiyi ------ 分類(lèi): 行業(yè)動(dòng)態(tài) ------ 人瀏覽過(guò)-----時(shí)間:2014-4-19 17:15:0

    研究細胞的精細結構時(shí),還可采用一種很有用的方法,叫做表面展開(kāi)法。展開(kāi)
層附著(zhù)在銅網(wǎng)上,干燥后再經(jīng)過(guò)金屬鑄影即可供電子顯微鏡研究。例如,用此法可
制備細菌染色體標本。先用溶菌酶把細菌細胞膜消化掉,將得到的原生質(zhì)體置于蒸
餾水中使之脹破,染色體可呈一條長(cháng)纖維游離出來(lái)并展開(kāi)在蒸餾水的表面,撈起后
可進(jìn)一步制成供電子顯微鏡觀(guān)察的標本。植物和動(dòng)物細胞的間期染色體,以及某些
細胞含有的微管,都可采用這個(gè)方法制片。

    使用電子顯微鏡時(shí)最不方便之處,就是須要制備干燥的超薄切片并須在真空中
進(jìn)行觀(guān)察。超薄切片機的出現使制片的困難大部分得到克服。利用這種切片機可以
切出厚度為0.2 至0.02微米的切片。但是,脫水和除去溶于樣品中的鹽類(lèi)以及染色
劑的應用,都會(huì )改變結構。因此,對電子顯微鏡下觀(guān)察到的生物膜、細胞質(zhì)或其它
有形成份,在解釋和說(shuō)明時(shí)應持慎重態(tài)度。盡管有這些困難,但是越來(lái)越清楚地看
到,近年來(lái)由于用電子顯微鏡研究所做出的貢獻,使我們對細胞的了解達到了一個(gè)
嶄新的水平。

    如果某些生物樣品在染色后其結構與背景的反差仍然很弱,這時(shí)常采用重金屬
鑄影法來(lái)加強反差,甚至可得到三維圖象。將重金屬,特別是金、鉑、鉻置于真空
蒸鍍器中加熱蒸發(fā),使金屬蒸氣斜向地噴濺到樣品上。就像流沙或雪花被風(fēng)吹到地
面的物體上形成陰陽(yáng)面一樣,噴濺到樣品上的金屬也可把樣品的輪廓勾劃出來(lái)。在
蒸發(fā)噴濺時(shí),還可使樣品轉動(dòng),從不同方向進(jìn)行鑄影。

    如果樣品太厚不宜用鑄影法時(shí),還可采用復型法。其法是在真空中用金屬蒸發(fā)
法在樣品表面鍍一層厚度達若干纖米的鉑和碳。然后用氫氧化物溶去樣品,漂浮的
復型用銅網(wǎng)撈起,制成供電子顯微鏡觀(guān)用的標本。


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