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本文標題:"DNA制備實(shí)驗需要使用好幾種技術(shù)-生物顯微鏡"

發(fā)布者:yiyi ------ 分類(lèi): 行業(yè)動(dòng)態(tài) ------ 人瀏覽過(guò)-----時(shí)間:2016-2-2 1:44:59

DNA制備實(shí)驗需要使用好幾種技術(shù)-生物顯微鏡

 
  核酸的放射性標記
 
  許多實(shí)驗需要使用放射性核酸,可采用好幾種技術(shù),通過(guò)讓細
胞生長(cháng)在放射性培養基中來(lái)標記生物分子,所依據的基本原理是
在可能的情況下于培養基中加入一種唯一能進(jìn)入所研究分子的前
體,對DNA來(lái)說(shuō)這并不復雜,因為胸腺嘧啶和胸苷只能用于DNA的
合成,因此,如果把胸苷或胸苷放入培養基中,新復制的DNA將
分別含有這是制備放射性DNA最常用的方法,有時(shí)需要的放射懷
比由放射性胸苷所提供的量要更大時(shí),那么就使用以形式加入,
但是,在這樣做的時(shí)候,DNA和RNA以及其他含磷化合物都被標記
上了,如果只奇想放射性DNA,可以用如前所述的RNe或烯堿處理
標記的細胞,水解除去RNA,然后只須將DNA分子與游離的RNA核
苷酸分離,有好幾種簡(jiǎn)單方法可做以這點(diǎn)。
 
 對RNA唯一獨特的物質(zhì)是核酸,但是,如果把放射性核糖加入培
養基中,它會(huì )被代謝,幾乎所有的含碳化合物中都會(huì )出現標記,
最好的前體是尿苷或尿苷,它可轉變灰尿苷三磷酸,然后聚合到
RNA中,但是,有些尿苷轉變?yōu)閁TP,它再甲基產(chǎn)生胸苷三磷酸,
然后聚合到,因此用處理細胞抽取液來(lái)水解除去DNA,RNA也可以
用P標記,最后一步必須用除去DNA。
 

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