本文標題："顯微鏡計數前需要用濾膜將一定體積的細胞濃縮"
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顯微鏡計數前需要用濾膜將一定體積的細胞濃縮
當需計數的樣品幾乎不含細胞或者細胞濃度非常低時(shí)(如灌裝
流水線(xiàn)上的葡萄酒)，在顯微鏡計數前需要用濾膜(<0．45μm)將一
定體積的細胞濃縮。
1．用9mL稀釋空白液和樣品充分混勻，準備合適梯度的待測樣
品。
2．將血球計數板上的蓋片蓋在計數槽上。
3．如果計數前需要進(jìn)行細胞染色，必須將樣品和染色液混合
均勻。記錄體積和特定的稀釋參數。
4．使用移液管將稀釋或未稀釋的樣品滴1滴于血球計數板上每
個(gè)待測表面的輸液槽(V形凹槽)內，通過(guò)毛細管滲透作用，蓋片下
的樣品溶液將均勻滲透入計數區域中?；蛘?，將最終稀釋液直接滴
1滴于計數方格中，之后蓋上蓋片。盡管這種方法也可行，但蓋蓋
片時(shí)要非常小心，避免在計數區域內出現氣泡。另外，溶液未充滿(mǎn)
計數方格或者溢出計數槽都是不行的。
5．使用顯微鏡時(shí)，可以選擇40×或100×的物鏡放大倍數，統
計足夠量的方格中的細胞數，使細胞總數約600個(gè)。分別統計血球
計數板上的2個(gè)計數區域的細胞數，再相加取平均值。
6．計算公式：原始樣品菌數(細胞個(gè)數／mL)=計數區域內的平
均細胞數×用于計數的溶液體積×稀釋倍數
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