本文標題:"由載玻片和蓋玻片組成的特殊顯微計數板"
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由載玻片和蓋玻片組成的特殊顯微計數板
樣本中的原核生物數量可以用兩種方式表示:總細胞計數(蛐l
count)和活細胞計數(viable count)。前者是估計細胞的總數,
無(wú)論是活細胞還是死細胞都計算在內;后者是指在檢測條件下能夠
生長(cháng)的細胞數量??偧毎嫈凳峭ㄟ^(guò)將樣本用已知量的緩沖液稀釋
后在血球計數板上計數每個(gè)小方格中細胞數的方法獲得的。血球計
數板(haemo-cytometer)是一種由載玻片和蓋玻片組成的特殊顯微
計數板,在顯微鏡下觀(guān)察時(shí)就可以發(fā)現載玻片上有許多已知尺寸的
小格子。通過(guò)數每個(gè)小格子中細胞的數量就可以估計每毫升原始樣
本中細胞的數量。流式細胞儀(flow cytometry)計數法的原理與之
相似,它是將微量樣品通過(guò)大約只有一個(gè)細胞粗細的毛細管,并利
用激光照射法完成樣品中顆粒數量的電子計數。
最近這些計數方法已經(jīng)被定量PCR技術(shù)(quantitative PCR,QP
CR)取代。這種計數方法是通過(guò)計算個(gè)體基因的拷貝數實(shí)現的。例
如,如果估計到了每毫升樣本中16S rRNA基因的拷貝數,就可以得
出細菌的數量。盡管可以利用特異性引物對同一個(gè)樣品進(jìn)行平行實(shí)
驗,但這種方法仍有一些缺點(diǎn)(如不能確定是否所有細菌基因組中1
6S rRNA基因及其他目標基因只有一個(gè)拷貝)。
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由載玻片和蓋玻片組成的特殊顯微計數板,金相顯微鏡現貨供應
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