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本文標題:"熒光顯微技術(shù)能夠直接、及時(shí)觀(guān)察細胞膜的變化"

發(fā)布者:yiyi ------ 分類(lèi): 行業(yè)動(dòng)態(tài) ------ 人瀏覽過(guò)-----時(shí)間:2013-5-3 5:16:5

 FRET原理是一熒光物質(zhì)(donor)受到特定波長(cháng)的光線(xiàn)照射后會(huì )被激發(fā)而發(fā)出另一特定波長(cháng)的光,

此能量轉移的距離約7-10 nm,在此距離內若有一接收者
(acceptor)則此能量會(huì )被吸收,而熒光減弱。FRET廣泛應用于膜蛋白的研究
藉由donor與acceptor標識在欲觀(guān)察的分子上,便可由熒光強弱知道兩種
分子結合與混合程度。Fluorescence quenching與FRET的原理類(lèi)似,
 
這類(lèi)熒光分子在高濃度(~70mM)彼此距離接近時(shí)會(huì )發(fā)生分子之間會(huì )發(fā)生self-quenching的現
象而讓熒光減弱,而在低濃度時(shí)熒光較強。Fluorescence quenching經(jīng)常被運用到
微胞洩漏實(shí)驗,當細胞膜上有破洞產(chǎn)生時(shí),如果熒光分子外洩則濃度降低,
因而造成熒光強度變化。FRAP的原理是在細胞膜的局部區域, 
 
以激光光源集中激發(fā)局部區域, 讓其造成分子局部的熒光漂白,再來(lái)測量熒光回復的速度。
而從回復的速度可以知道脂質(zhì)分子擴散速率,進(jìn)而了解細胞膜相變的機制。
相較于前面所提的熒光技術(shù),熒光顯微技術(shù)是一個(gè)能夠直接、及時(shí)觀(guān)察細胞膜上
變化的技術(shù)。當人造膜上有兩種區塊共存時(shí),
被標識的熒光分子會(huì )選擇停留在特定的區塊而產(chǎn)生熒光分部不均勻,
來(lái)提供足夠的反差來(lái)觀(guān)察人造膜上區塊尺寸大小、形狀與動(dòng)態(tài)行為
 

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