本文標題:"酵母菌初始細胞數對細胞增生測試的影響"
酵母菌初始細胞數對細胞增生測試的影響
因此次試驗個(gè)數眾多,故以96孔盤(pán)配合酵素分析儀做為推估細胞生長(cháng)情形,觀(guān)測雌性激素對酵母菌增生情形,
以乙基雌二醇為測試對象,在初始細胞數不同時(shí),培養24小時(shí)的結果如圖五,空白試驗于低細胞濃度初始值
如1000或10000 cell/ well下,吸光值并沒(méi)有明顯增加,但是酵母菌細胞數濃度在50000、100000 cell/ well,
即使沒(méi)有雌性激素,吸光值仍明顯高于細胞數1000 cell/ well之吸光值,且估計約有3 x 106cell/ well,
由此數據顯示似乎酵母菌有增生的情形,但是由于96孔盤(pán)孔徑小,所容許的培養液僅200 m L,
培養液于培養過(guò)程中不易隨軌道震蕩器搖晃,使達混合菌液的目的,又因酵母菌細胞比重較大,
在培養液中若不經(jīng)搖晃混合。容易自然沉降至底部,造成細胞凝集的現象,使得吸光度增高,
而高估細胞濃度,所以推論空白試驗在初始細胞數高的情況下,由于細胞的凝集而造成細胞增生的假象,
因以96孔盤(pán)進(jìn)行此試驗僅能初步觀(guān)察其有無(wú)明顯雌性激素增生,而無(wú)法進(jìn)行定量的計算。
細胞濃度1,000 cell/ well在乙基雌二醇濃度0.2 ppb時(shí)有明顯吸光值,但是0.2至5 ppb吸光值無(wú)明顯差異(p<0.05
細胞濃度10,000 cell/ well在乙基雌二醇濃度0.05 ppb時(shí),有明顯吸光值隨著(zhù)乙基雌二醇濃度增加吸光值明顯增
加,細胞濃度50,000、100,000 cell/ well在乙基雌二醇濃度0.05 ppb時(shí)就有明顯吸光值
以96孔盤(pán)觀(guān)察不同初始細胞濃度對雌二醇刺激酵母菌增生的情形,以雌二雌培養酵母菌效果不若乙基雌二醇佳,
空白組在初始濃度如同乙基雌二醇試驗一般,50,000及100,000 cell/ well也有增生的假象,
細胞數除了初始細胞濃度為10000 cell/ well有明顯的增生,50,000及100,000 cell/ well雖有增生,
但增生細胞數并不與濃度成正相關(guān)。因培養液不易混合均勻,而使細胞凝集造成測值與濃度不容易有明顯正相
關(guān),故以96孔盤(pán)進(jìn)行測試,僅能初步篩選其對酵母菌有無(wú)促其增生的效果的定性推測,而無(wú)法定量觀(guān)察。
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