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本文標題:"用光學(xué)顯微鏡可對蛋白質(zhì)定位細胞形狀研究顯微鏡"

發(fā)布者:yiyi ------ 分類(lèi): 行業(yè)動(dòng)態(tài) ------ 人瀏覽過(guò)-----時(shí)間:2015-12-3 15:26:22

用光學(xué)顯微鏡可對蛋白質(zhì)定位細胞形狀研究顯微鏡

 
細胞形狀的每時(shí)每刻維持也依賴(lài)于細胞骨架成分的裝配。
現有兩種實(shí)驗方法可用于檢測間期細胞骨架的裝配,但
這兩種方法都有某些局限性。一種方法是微注射可在體外裝
配的熒光標記蛋白,用光學(xué)顯微鏡可對蛋白質(zhì)定位;某
些動(dòng)力學(xué)特征可用光漂白測定。以這種方式觀(guān)察到的結構幾
乎總是可信的,即其結果與免疫熒光所見(jiàn)相符合。微注射方
法有某些限制性,它們只能用于識別與溶相交換的結構組分,
 
但是不能檢出在數小時(shí)內不發(fā)生交換的極為穩定的組分。它
們不能鑒別裝配和交換。注射后立刻彌散的方式變成為分離
定位的方式。這是與裝配成進(jìn)行交換的結構或與有限數目結
合部位的連接一樣都是相一致的。動(dòng)力學(xué)可能起指令作用。
業(yè)已發(fā)現a肌動(dòng)蛋白和vinculin與粘附斑緊密地結合,但這
需要數小時(shí),而它們所連接的結構的形成和溶解只需數分鐘。
這表明,雖然蛋白質(zhì)密切地結合,但它們進(jìn)入這些結構的通路
不是細胞內的主要途徑。這些研究的另一個(gè)局限性是熒光會(huì )
使結構擴大。這些研究的要點(diǎn)是:(1)用此方法觀(guān)察到的裝
配通常是可靠的;(2)動(dòng)力學(xué)上能與結構本身的形態(tài)區別;(3)
 
在某些情況下,它是細胞特異的;(4)微管蛋白裝配的方向
與遠側快裝配端是一致的;(5)用這種技術(shù)在任何細胞中檢出
的最活動(dòng)種類(lèi)肌動(dòng)蛋白比肌動(dòng)蛋白單體大,提示細胞內只有
極少量的肌動(dòng)蛋白是游離G肌動(dòng)蛋白,這些緩慢移行的
復合物可能是肌動(dòng)蛋白低聚物?;蚴桥c肌動(dòng)蛋白特異蛋白相
連接的肌動(dòng)蛋白。 

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