本文標題："復制DNA分子的高分辨率電子顯微鏡圖分析顯微鏡"
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復制DNA分子的高分辨率電子顯微鏡圖分析顯微鏡
DNA連接酶
無(wú)論從帶有引物的環(huán)狀單鏈還是從缺口上復制都不會(huì )得到連續
的子鏈，這種不連續性是因為沒(méi)有一種已知的聚合酶能夠把基團
和基團連接進(jìn)來(lái)，這些基團的連接是由DNA連接酶完成的，這種酶
在復制以及其他重要過(guò)程中發(fā)揮作用。
大腸桿菌連接酶能夠把相連接，只要這兩個(gè)基團都在相鄰脫氧
苷酸堿基配對的末端，這種酶不能填補缺口。
在一般的聚合反應中，形成磷酸二酯鍵所需要的活化能來(lái)自三
磷酸鹽的裂解，歷為DNA連接酶只有單磷酸鹽參與， 所以需要有
其他的能量來(lái)源，這一能量取自ATP或DNA的水解，究竟用哪一種
能量由DNA連接酶所在的生物所決定，大腸桿菌DNA連接酶用NAD作
為能量來(lái)源。
結果證明法數左右的岡崎片段是真正的前體片段，不連續全成
模型大概是正確的，進(jìn)一步支持這一模型的是復制DNA分子的高分
辨率電子顯微鏡圖，在復制叉有一邊顯示一個(gè)短單鏈區域，這一
區域的起因是，不連續鏈的合成的起始是周期性的，也許起始需
要特定的堿基順序或某些其他信號，事實(shí)上，連續復制畹的末端
常常處在不連續鏈的前沿，因此用了前導鏈和后隨鏈這兩個(gè)術(shù)語(yǔ)
分別表示連續復制鏈和不連續復制鏈。
上述實(shí)驗都是在大腸桿菌中進(jìn)行的，是一種普遍現象，因為曾
在許多細菌、噬菌體、動(dòng)物病毒和真核生物中觀(guān)察到。在真核生
物中片段長(cháng)度只有100至200個(gè)堿基，但還不了解這些小片段究竟
是代表前體片段的真實(shí)長(cháng)度，或僅僅是由于有較多的結果，因為
還沒(méi)有從真核生物中分離到突變體。
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