本文標題："測量酶活性可用中止反應試驗-生物實(shí)驗"
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測量酶活性可用中止反應試驗-生物實(shí)驗
中止反應法測定酶活性
測量酶活性可用中止反應法(Stoppedmethod)或連續反應法中
止反應法是將酶反應按時(shí)即刻完全停止，取出反應物或產(chǎn)物，于以
分離，再確定產(chǎn)物的生成量或反應物的消耗量，算出酶活性。連續
反應法無(wú)需取樣中止反應，而是在酶反應過(guò)程中，用儀器來(lái)監測反
應進(jìn)行的情形，記錄結果，算出酶活性。連續法用一個(gè)樣品可以作
多次測定，使用方便，又極易查出動(dòng)力學(xué)的反應級數。若是零級反
應，產(chǎn)物的量當與酶活性成正比，可以立刻算出結果，但是很多酶
反應卻無(wú)法使用連續法，而中止反應法雖略感不便，幾乎任何酶都
可以用這種方法測量酶活性。
中止反應法 中止反應法是在酶和底物的恒溫反應過(guò)程中，在
到達各個(gè)予定的時(shí)間時(shí)，取出定量的樣品，使酶立刻變性，不再反
應，然后測量反應產(chǎn)物的生成量。由零時(shí)開(kāi)始，產(chǎn)物的生成量至少
在開(kāi)始階段的一兩分鐘內應形成直線(xiàn)形的增加，否則一定是測量錯
誤，或反應條件不對，才會(huì )發(fā)生偏差。欲使酶變性，最常用的方法
是加入三氯乙酸或過(guò)氯酸使酶蛋白沉淀。
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