本文標題："標準平板計數法計數微生物是最廣泛應用的一種方法"
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標準平板計數法計數微生物是最廣泛應用的一種方法
從環(huán)境試樣中分離微生物的過(guò)程常常需要進(jìn)一步分離從涂布或傾注平板法中
發(fā)現的單個(gè)菌落，對其鑒定或確認。在這個(gè)方法中，常用無(wú)菌接種環(huán)把菌落從原
始培養平板中挑取并劃線(xiàn)稀釋到新的瓊脂培養皿中
標準平板計數法計數微生物是微生物學(xué)中最古老、最廣泛應用的一種方法。
盡管廣泛應用，這種稀釋平板技術(shù)自從它的使用之初就受到懷疑和批評。主要批
評的一點(diǎn)是:像顯微觀(guān)察那祥，整個(gè)群體中僅有很少部分能在實(shí)驗室培養基中培
養。大量文獻說(shuō)明，直接顯微計數的細胞數中只有1%一10%的細胞能用平板計
數技術(shù)復活成可活的細菌。各種方法之間存在的巨大差異可能是多
方面的因素產(chǎn)生的。首先，低底物水平的環(huán)境試樣中含有一些營(yíng)養饑餓或寡營(yíng)養
生物，它們生長(cháng)得很慢或根本就不可培養，所以不能在規定時(shí)間內形成菌落;其
次，由于提取和稀釋過(guò)程中施加的壓迫導致活的微生物變得不可培養;再一個(gè)原
因就是菌落形成過(guò)程中細菌間的競爭抑制了某些微生物的生長(cháng);另外，所有微生
物都在營(yíng)養物和電子受體需求方面有不同的最適宜及最低的生長(cháng)條件。因此，某
些微生物在培養基中長(cháng)得很慢或根本不生長(cháng)。因為大多數自然環(huán)境都是寡營(yíng)養
的，因而平板培養基的營(yíng)養狀況是進(jìn)行活細胞計數所考慮的重點(diǎn)。許多土壤分離
菌在貧營(yíng)養培養基中比富營(yíng)養培養基中生長(cháng)、繁殖得更好。最后，活細菌的回收
(指使一個(gè)細胞形成一個(gè)菌落)所產(chǎn)生的偏差是由于提取步驟中細菌從土壤顆粒
中的不完全釋放或稀釋過(guò)程中細菌的不完全分離。這使得菌團長(cháng)成了單個(gè)菌落，
從而導致出現的菌落數偏低。很難確定這些因素中是哪一種導致直接計數與活細
胞計數間存在的1-2個(gè)數量級的差異。
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